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鸡骨草叶中N-反式对香豆酰酪氨酸的纯化工艺优化
建立鸡骨草叶中N-反式对香豆酰酪氨酸的含量测定方法,并优化其纯化工艺。方法:采用高效液相色谱法测定鸡骨草叶中N-反式对香豆酰酪氨酸的含量,色谱柱为Hypersil BDS C18,流动相为0.1%甲酸水溶液(A)-甲醇(B)(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,柱温为25℃,检测波长为300 nm,进样量为10μL。以聚酰胺树脂为材料,以N-反式对香豆酰酪氨酸得率为指标,采用单因素试验优化N-反式对香豆酰酪氨酸纯化的样品溶液质量浓度、上样量、静置吸附时间等条件。结果:N-反式对香豆酰酪氨酸检测进样量线性范围为2.575~51.50μg(r=0.999 9);定量限为0.000 618μg,检测限为0.000 129μg;精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于3%;加样回收率为97.04%~102.43%(RSD=2.06%,n=6)。最优纯化工艺为样品溶液质量浓度为0.04 g/mL(以鸡骨草叶药材计),上样量为50 m L,上样流速为1.0 m L/min,静置吸附时间为20 min,以水(含0.1%乙酸)、20%乙醇(含0.1%乙酸)、氨水(pH 10)为洗脱溶剂依次洗...